Высокочувствительные системы имиджинга и документирования серии Odyssey, LI-COR

Многофункциональные имаджинговые системы LI-COR серии Odyssey - это:
получение и анализ изображений (блотов и др.) методом детекции флуоресценции в ближней ИК-области и хемилюминесценции.

Системы имаджинга LI-COR Odyssey обеспечивают высокоточный количественный анализ блотов и других мишеней методом детекции флуоресценции в ближней ИК-области и хемилюминесценции.

Системы Odyssey выведут Ваши эксперименты и анализ результатов на абсолютно новый уровень!

Некоторые преимущества систем имаджинга LI-COR Odyssey:

• Высочайшая чувствительность
• Широчайший динамический диапазон (4-6 порядков)
• Одновременное обнаружение сигналов высокой и низкой интенсивности за одно сканирование
• Отсутствие проблемы перенасыщения полос
• Продвинутая технология возбуждения флуоресценции
• Оригинальная технология сканирования
• Гарантированная надежность получаемых данных
• Одновременное обнаружение множественных мишеней за одно сканирование (каналы 700 и 800 нм)
• Отсутствие необходимости в множественных длительных экспозициях
• Истинный количественный анализ результатов
• Великолепное качество изображений, низкий фон
• Чувствительность выше или на уровне пленки

Функциональные возможности систем имаджинга LI-COR серии Odyssey

Методы детекции ИК-флуоресценции и хемилюминесценции.
Анализ вестерн-блотов, гелей окрашенных Кумасси и др., анализ ДНК/РНК, окрашенных Syto 60 и др., анализ клеточных вестернов (In- / On-Cell Western), анализ белковых микрочипов, EMSA, ELISA, FLISA, получение изображений гистологических срезов, эффективная детекция хемилюминесценции и многое другое!

Общая информация по методам документации

В течение многих лет для получения изображений вестерн-блотов применялась хемилюминесценция в сочетании с пленочной детекцией.

Однако данный метод обладает рядом недостатков:

• Требуется отдельная, специально оборудованная, фотографическая лаборатория;
• Требуются дорогостоящие реагенты для проявки и фотографические пластины;
• Отдельные затраты на утилизацию токсичных реагентов, применяемых при проявке фотографических пластин;
• В большинстве случаев для детекции сигналов различной интенсивности требуются многократные экспозиции;
• Процедуры проявки длительные и трудоемкие;
• Узкий динамический диапазон и, как следствие, проблемы с перенасыщением и угасанием полос;
• Количественный анализ результатов затруднен.

Между тем, требования научных журналов к отчетности и воспроизводимости результатов непрерывно растут. Недавно на смену пленке пришли цифровые методы детекции, что позволило расширить динамический диапазон метода и упростило процедуру количественной оценки результатов. Динамический диапазон фотопленки – 1 порядок, динамический диапазон большинства современных цифровых имаджеров – 2-3 порядка, динамический диапазон систем серии Odyssey – более 6 порядков. Столь широкий динамический диапазон позволяет за одну экспозицию с одинаковой четкостью детектировать как очень сильные, так и очень слабые сигналы. Отпадают проблемы засвечивания более слабых сигналов более сильными и эффекты перенасыщения. Однако хемилюминесценция, в виду того, что является ферментативной реакцией, не позволяет произвести истинного количественного анализа данных. Полуколичественный анализ с применением данной технологии требует длительной и сложной процедуры построения калибровочной кривой. В течение последних лет для детекции вместо хемилюминесценции все чаще стала применяться флуоресценция.

Основные преимущества документирования методом детекции флуоресценции

• Флуоресценция не является ферментативной реакцией и в меньшей степени зависит от условий окружаю- щей среды.
• Интенсивность сигнала прямо пропорциональна концентрации мишени, что дает возможность произвести истинный количественный анализ.
• Не требуются продолжительные экспозиции.

Основные преимущества систем формирования изображений LI-COR серии ODYSSEY

➪ Высокоточная, быстрая и простая качественная и количественная обработка Вестерн-блотов с отлично воспроизводимыми результатами. Запись и обработка изображений может производиться как в ручном, так и в автоматическом режиме. Автоматический режим позволяет получить высококачественные и воспроизводимые результаты «нажатием одной кнопки».

➪ Во всех системах LI-COR, работающих на принципе детекции ИК-флуоресценции, для возбуждения флуоресцентного сигнала используются твердотельные диодные лазеры. Использование лазера позволило отказаться от сложной системы светофильтров, существенно повысить интенсивность сигнала, а также позволило достичь максимально четкого расхождения спектров возбуждения и эмиссии. Как следствие, существенно повысилась разрешающая способность систем.

Преимущества использования лазера для возбуждения флуоресценции.

➪ Системы LI-COR работают в ближнем ИК-диапазоне (680 - 820 нм), в пределах которого показатели поглощения, автофлуоресценции и светорассеяния для воды, большей части биологических объектов, а также пластика и мембран – минимальны. Это существенно снижает интенсивность фонового сигнала и повышает разрешающую способность.

В диапазоне длин волн 680 - 820 нм показатели поглощения, автофлуоресценции и светорассеяния для воды, большей части биологических объектов, а также пластика и мембран – минимальны.

➪ Возбуждение и детекция флуоресценции идут параллельно по двум независимым каналам (700 и 800 нм), что позволяет одновременно детектировать до трех мишеней в одном образце. Сигналы не перекрываются и не оказывают влияния друг на друга.

➪ Широкий динамический диапазон (до 6 порядков) и высокое разрешение позволяют одновременно детектировать как очень сильные, так и очень слабые сигналы. Нет необходимости во множественных экспозициях.

➪ Все это, наряду с передовым программным обеспечением Empiria Studio позволяет добиться поистине феноменальной четкости изображений и точности количественного анализа.

➪ Помимо документации вестерн-блотов, системы LI-COR серии Odyssey имеют широкий спектр других применений (см. ниже).

➪ Экономия средств:

➪Нет затрат на проявочные реагенты и фотографические пластины;

➪Не требуется тратить средства и пространство на содержание фотографической лаборатории;

➪Нет затрат на утилизацию токсичных реагентов.

➪Экономия времени:

➪ Системы LI-COR серии Odyssey полностью настроены и готовы к использованию.

Нет необходимости вникать в подробности функционирования и тратить время на подбор параметров глубины фокуса и длины экспозиции. Автоматический режим детекции позволяет получить изображения идеального качества нажатием всего одной клавиши.

➪ Системы LI-COR серии Odyssey позволяют детектировать несколько мишеней одновременно (до трех на одной мембране). Благодаря этому экономится время, которое ранее ушло бы на отмывку и повторную гибридизацию образцов.

➪ Системы LI-COR серии Odyssey позволяют одновременно и с высокой точностью детектировать как очень сильные, так и слабые сигналы. Сигналы не перекрываются и не оказывают влияния друг на друга. Нет необходимости переснимать одну и ту же мембрану. Благодаря этому экономится время, которое ранее тратилось на проведение множественных экспозиций с целью детекции сигналов различной интенсивности.

➪ За 5-7 минут вы получаете весь набор данных (информацию о всех возможных экспозициях образца), в то время как при работе с хемилюминесценцией только одна экспозиция может длиться от 7 до 40 минут.

➪ Специальные реагенты, предлагаемые компанией LI-COR, позволяют легко присоединить флуоресцентную метку к первичным антителам, а разрешающая способность систем серии Odyssey позволяет с высокой точностью детектировать даже очень слабый сигнал. Таким образом, время на проявку Вестерн-блота сокращается минимум вдвое, поскольку исключается стадия инкубации со вторичными антителами.

➪ Процедура очистки системы крайне проста. Таким образом, экономится время, которое ранее тратилось на уборку фотографической лаборатории.